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原创文章

原创文章:洋葱伯克霍尔德菌培养基推荐

2019-05-31

1980年,某吸入剂疑似污染洋葱伯克霍尔德菌,导致数名患者死亡,引起了美国FDA的注意,该菌已经被美国FDA列为不可接受微生物。近40年来,洋葱伯克霍尔德菌已经成为全球制药行业产品中检出率最高的不可接受微生物之一,以下是美国FDA2018年发布的I类召回,也是最严重的召回类型,使用该生理盐水静脉注射器可能会导致患者感染洋葱伯克霍尔德菌。

 

 

 

洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia,B.cepacia)是引起囊性纤维化的重要条件致病菌,也是医院感染的重要病原菌之一。该菌可致多种医院内感染,包括败血症、心内膜炎、肺炎、伤口感染、脓肿和眼结膜炎等。B.cepacia 感染不仅引起患者肺功能逐渐恶化,还可导致全身感染症状,如坏死性肺炎、菌血症及脓毒血症等,B.cepacia 感染已成为重症监护病房呼吸道感染者死亡的独立危险因素。因此,快速准确地对该菌进行分离和鉴定非常重要。

 

常规培养基如MacConkey琼脂很难分离到B.cepacia,因为B.cepacia生长缓慢,容易被生长迅速的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌覆盖,应该使用B.cepacia选择性琼脂。Burkholderia Cepacia 琼脂(HiMedia®,M1640)以及OFPBL琼脂(HiMedia®,M1811)被推荐用于B.cepacia的分离培养。

 

Burkholderia Cepacia琼脂培养基(HiMedia®,1640)

Burkholderia Cepacia 琼脂是由Gilligan基于PC培养基设计而来,他发现该培养基比MacConkey琼脂更适合用于B.cepacia的生长。通过加入胆汁盐、结晶紫和抗生素使培养基产生B.cepacia选择性,其中抗生素是冻干补充剂(FD232)形式的多粘菌素B、庆大霉素和替卡西林。结晶紫和胆汁盐抑制革兰氏阳性球菌,包括肠球菌和葡萄球菌的生长。抗生素抑制革兰氏阴性菌的生长。B.cepacia代谢丙酮酸形成碱性终产物,提高培养基pH值,酚红指示剂在碱性pH下从粉橙色变为粉红色。

 

OFPBL琼脂培养基(HiMedia®,M1811)

OFPBL培养基是由Welch等人在1987年氧化发酵(Oxidation Fermentation,OF)培养基的基础性进行改良获得。他们发现,与其他选择性培养基如MacConkey琼脂、XLD琼脂和各种血琼脂相比,OFPBL琼脂可以改善B.cepacia的复苏和分离。OFPBL琼脂含有酪蛋白酶水解产物,为B.cepacia提供必需的硝基化合物,乳糖用作碳水化合物,B.cepacia很容易利用乳糖,乳糖的发酵释放酸性终产物,与培养基pH指示剂溴百里酚蓝反应。当产生足够的酸时,培养基从绿色变为黄色,使菌落呈黄色。该培养基的选择性归功于冻干补充剂(FD269)多粘菌素B和杆菌肽,它们可以很好地抑制呼吸道分泌物中其他细菌菌群的生长(抑制革兰氏阳性菌和奈瑟菌的生长)。