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原创文章

ATCC 10231白色念珠菌:微生物质控的“标准尺”

2026-10-12 宝录生物

在微生物检测与药物研发领域,标准菌株的价值堪比分析化学中的标准品。ATCC 10231作为白色念珠菌(Candida albicans)的模式菌株,自20世纪中叶被ATCC保藏以来,已成为全球制药、化妆品、食品及医疗器械行业质量控制体系中不可或缺的参照工具。理解这一菌株的生物学特性与规范使用方法,是确保微生物检测数据可靠性的基础。


菌株来源与分类地位

ATCC 10231的保藏历史可追溯至美国国立卫生研究院(NIH)的C.W. Emmons分离的编号3147菌株,后经Wright移交至ATCC,正式编号为ATCC 10231。该菌株分离自支气管真菌病患者,具有明确的临床来源背景。

在分类学上,白色念珠菌属于子囊菌门(Ascomycota)、酵母纲(Saccharomycetes)、酵母目(Saccharomycetales)。ATCC 10231的血清型为A型,其别名包括CBS 6431、CIP 48.72、IFO 1594、NCPF 3179、NCYC 1363等多个国际保藏编号。该菌株生物安全等级为2级,操作时需在相应防护条件下进行。


形态与培养特性

ATCC 10231在标准培养基上呈现典型的酵母样形态。在YEPD琼脂上25°C培养2天后,菌落呈乳白色、有光泽、表面光滑;陈旧菌落边缘可出现丝状结构,表面产生皱褶。细胞呈卵圆形,尺寸约3.0-6.0 × 4.0-8.0 μm,年轻培养物中以单芽生为主,偶尔聚集;陈旧培养物中细胞会伸长并形成链状分枝的假菌丝。

该菌株的推荐培养温度为24-26°C,需好氧条件。常用的培养基包括沙保弱琼脂(Sabouraud agar)、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)及YEPD培养基。在沙保弱琼脂上25°C培养24-48小时即可形成典型菌落。部分实验可在37°C下进行,但25-30°C是更为推荐的常规培养温度。


核心应用领域

ATCC 10231的价值集中体现在其作为国际药典与标准方法指定的质控菌株身份上。该菌株被多国药典及国际标准组织明确推荐用于以下领域:

制药微生物检验方面,ATCC 10231是美国药典(USP)、欧洲药典(EP)和日本药典(JP)多重章节指定的测试微生物。具体涵盖:无菌检查(USP <71>、EP 2.6.1、JP 4.06)、非无菌产品微生物计数(USP <61>、EP 2.6.12、JP 4.05 I)、特定微生物检查(USP <62>、EP 2.6.13、JP 4.05 II)、抗菌防腐效力测试(USP <51>、EP 5.1.3、JP G4)以及微生物限度检查(JP 5.02)。

消毒剂与化妆品测试方面,该菌株被推荐用于USP <1072>消毒剂与防腐剂测试、ASTM E640含水化妆品防腐剂标准测试方法,以及ISO 11930化妆品抗菌保护效果评价。AENOR UNE-EN 1275化学消毒剂杀真菌/杀酵母菌活性定量悬浮试验同样将其列为指定菌株。

此外,ATCC 10231被推荐用于ASTM E979-91标准测试方法,该标准仅指定分类学名称而未限定具体菌株时,ATCC 10231即为可用的标准参照。日本药典第14版亦将其列为无菌检查的指定菌株。


分子与基因组特征

ATCC 10231已完成全基因组测序,基因组大小约14.7 Mb,GC含量33.57%,采用Illumina与Oxford Nanopore混合组装策略,包含32个contig(N50为1,653,972 nt)。ATCC提供源自该菌株的基因组DNA产品(10231D-5)及定量基因组DNA(10231DQ),前者适用于PCR及分子生物学应用,后者专为qPCR标准曲线制备及分子检测方法的日常变异监控设计。

在表型特征方面,该菌株具有多种酶活性,包括D-阿拉伯糖酸内酯氧化酶、DNA拓扑异构酶、天冬氨酸蛋白酶及羊毛甾醇合酶等。该菌株还能产生苯乙醇和色醇,并生成法尼酸这一能够调控形态转换的自调节物质。


使用规范与注意事项

ATCC 10231以冻干粉或冷冻小管形式提供,后者需在-70°C或以下储存,-20°C条件下可保存最多1年。解冻时应将小管置于25-30°C水浴中直至刚好融化(约2-3分钟),避免搅动,解冻后立即用70%乙醇消毒管壁并转移至培养基中。严禁反复冻融,未使用部分应丢弃。

一个关键的规范要求是:用于无菌检查时,从ATCC原代培养物开始的传代次数不应超过5代。这一限制旨在确保菌株表型特征在质控试验中的稳定性与可追溯性。

在复苏培养方面,接种后通常在1-2天内即可观察到活力,但显著生长所需时间因具体条件而异,需定期检查。ATCC还提供MicroQuant™ 即用型定量质控产品,复苏后悬液浓度可达10⁷至10⁸ CFU/mL,可在2-8°C下保存最多8小时。


结语

ATCC 10231白色念珠菌之所以成为全球微生物实验室的“标准尺”,根源在于其明确的临床来源、完整的基因组数据以及被国际药典与标准组织广泛采纳的质控菌株地位。严格遵循规定的培养条件、传代限制与操作规范,是发挥其质控效能的前提。对于从事药品、化妆品及医疗器械微生物检验的实验室而言,正确理解和使用这一菌株,直接关系到检测结果的合规性与可靠性。